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        醫用三氧及其在肝病防治中的應用

        點擊次數:   更新時間:15/09/15 15:19:09     來源:關閉分    享:

          山東大學附屬濟南市傳染病醫院   陳士俊

          Email  csj7516@sina.com

          醫用臭氧治療慢性乙型肝炎研究

          ●l對45例慢性乙肝(CHB)患者

          ●l單用臭氧治療(臭氧血療法+臭氧直腸灌注),

          ●l每周3次,療程3個月

          ●l觀察臭氧治療慢乙肝療效與不良反應。

          初步結果顯示,

          ◆ 45 例CHB患者,聯合應答(肝功能復常,HBV DNA小于103拷貝/ml或下降2 log10,HBeAg陰轉)6例(13.0%) ;

          ◆ 14例(31.1%)患者治療后血清HBV DNA下降超過2log10,10例(10/35,28.6%)HBeAg血清轉換。

          ◆ 在完全應答病例中,最早在治療2周時即可觀察到HBV DNA下降1~2 log10,1個月時HBV DNA小于103拷貝/ml,ALT下降接近正常,部分患者血清病毒e抗原抗體轉換。

          ◆ 尤其是對干擾素治療無效及拉米夫定耐藥者(所謂難治性肝炎),用臭氧治療也有顯著療效。

          ◆ 多數患者(治療應答或無應答者)治療中感疲乏癥狀改善或自我感覺改善,未有因治療中出現不良反應而終止治療者,無嚴重不良事件發生。


          150例CHB患者,醫用臭氧組50例,α-干擾素組100例,為非隨機對照研究。

          ◆醫用臭氧組50例:1例未完成療程,4例隨訪中失訪,其余45例完成24周隨訪。男37例,女8例,平均年齡31.45歲(13-55歲);

          ●HBeAg(+)35例。

          ◆α-干擾素組100例:3例未完成療程,1例失訪,其余96例完成24周隨訪。男74例,女22例,平均年齡27.09歲(6-54歲);

          ● HBeAg(+)78例。

          ◆兩組病例在年齡、性別、ALT、AST、DNA、HBeAg 陽性比例、TBIL、DBIL、ALB、GLB、肝組織病例炎癥分級及感染時間都無統計學差異。

          ◆醫用臭氧組:用臭氧自血回輸療法聯合醫用臭氧直腸灌注療法,每周3次,平均療程16周。

          ◆α-干擾素組:國產普通干擾素每次5Mu皮下注射,3次/周,平均療程36周。療程結束后隨訪24周。

          醫用臭氧聯合阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎的對照臨床研究

          方法

          71例CHB患者分兩組,阿德福韋酯加醫用臭氧治療聯合治療組38例:;

          阿德福韋酯單用對照組33例。

          醫用臭氧采用臭氧自血回輸加臭氧直腸灌注治療,每周3次,連續12周。比較兩組治療前及治療后第24、48、72周血生化指標(ALT、TBil)、HBV DNA 和HBV血清學標志物。

          醫用臭氧對慢性乙肝外周血單個核細胞作用

          目的  觀察臭氧體外對慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者外周血單個核細胞(PBMC)分泌細胞因子的影響,初步探索臭氧治療CHB的細胞免疫學機理。

          方法 常規分離CHB患者(n=11)和健康志愿者(n=8)PBMC,分別接受不同濃度臭氧刺激培養72小時,設立空白、純氧或植物血凝素(PHA)作用組三個對照組,酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測其上清中IFN-γ和IL-4水平。

          結果 CHB患者PBMC分泌的IFN-γ整體水平高于健康人(P=0.001),而IL-4水平略低于健康人。

          低濃度(4、10μg/mL)臭氧可以輕微刺激PBMC分泌IFN-γ和IL-4,而高濃度(40、80μg/mL)臭氧則有抑制作用。

          結論  臭氧對CHB患者PBMC分泌細胞因子的影響不同于健康人群。PBMC對氧化作用特別敏感,尤其是在低抗氧化能力的血清存在時。PBMC分泌細胞因子的水平與臭氧濃度密切相關,大致低濃度臭氧可以輕微刺激IFN-γ和IL-4分泌,而高濃度臭氧則有抑制作用。

          醫用臭氧化鹽水靜脈注射預防藥物性肝損傷及機制研究

          目的 驗證醫用臭氧化鹽水靜脈注射能夠保護肝組織免于氧化損傷,并證明其抗氧化作用是通過Keap1-Nrf2-ARE通路來實現的,依賴于Nrf2,從而起到保護機體的作用。(核因子-2相關轉錄因子-抗氧化反應原件)

          方法 健康SD大鼠隨機分為臭氧生理鹽水(OS)組、模型組和對照組。OS組和模型組大鼠尾靜脈分別注射5ml/kg臭氧生理鹽水或5ml/kg氧氣鹽水,每日1次,連續15天,

          第16天予50%CCl4橄欖油溶液2ml/kg腹腔注射造肝損傷模型。對照組不予任何預處理,第16天2ml/kg橄欖油腹腔注射。

          造模24小時后,檢測大鼠血清谷丙轉氨酶(ALT) 、谷草轉氨酶(AST)、肝組織總抗氧化能力(TAOC)、還原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)、過氧化氫酶(CAT)、丙二醛(MDA)。

          再提取處死大鼠肝組織的核蛋白,運用免疫印跡方法測定其細胞核中Nrf2的含量。

          根據前面實驗的氧化損傷模型參數,用30ug/ml臭氧生理鹽水預處理大鼠,方法同前,觀察肝細胞核內Nrf2的含量。

          結果 OS可減輕CCl4所致大鼠肝損傷,與模型組比較,6個不同臭氧濃度OS組大鼠ALT、AST顯著減少(p<0.01或p<0.05),TAOC、GSH、GPx 、CAT升高、MDA降低,部分有顯著差異(p<0.05),

          其中以30ug/mlOS組療效最佳; 30ug/ml OS組較模型組ALT、AST峰值低43.0%、42.9%(p<0.05),TAOC谷值高25%(p<0.05),峰/谷期延后。

          O3能增強肝組織內Nrf2的表達,Keap1-Nrf2-ARE通路的激活在O3抗氧化過程中發揮了重要的作用。

          結論 O3是細胞內重要轉錄因子的激活劑,通過激活Keap1-Nrf2-ARE通路及其下游基因降低細胞內活性氧,減輕有害物質對肝組織造成的氧化損傷,并且臭氧呈現一定的劑量依賴。

          對肝炎治療有人把三氧比喻為:相當于當前抗病毒藥物+降酶退黃“護肝”藥物+免疫調節藥物的總和。

          很有可能成為與干擾素、核苷類似物完全不同的、更加安全、適應證更廣的第三類治療方法。應用前景不可估量。

          醫用三氧治療病毒性肝炎原理推想有以下幾點:

          1.三氧的免疫激活和免疫調節作用。通過誘導細胞產生多種細胞因子(干擾素、白介素等),提高機體抗病毒免疫作用;

          2.抗氧化, 通過直腸灌注三氧和純氧混合氣體,通過門靜脈吸收入肝,對肝臟具有改善微循環、清除自由基而顯示出護肝作用。

          3.增加紅細胞攜氧能力,促進肝細胞回復或再生

          ◆ 藥物性肝炎(包括酒精性肝炎)非常普遍,尤其是腫瘤化療藥物和肝臟放射治療,多具有肝毒性和損傷性,引起肝衰竭死亡也較常見。當前還沒有預防該類肝損傷的有效方法。

          ◆醫用三氧直腸灌注可以預防實驗鼠肝腎缺血再灌注損傷。同缺血再灌注損傷相同,化療藥物和肝臟放射損傷的一個重要機理是通過產生大量對組織細胞有損傷的自由基。

          ◆三氧具有誘導組織細胞產生抗氧化抗自由基作用,推測三氧預防性治療有可能達到預防藥物或放射性肝炎作用。


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